rekayasa
genom pada tanaman berbunga yang sangat efisien--T-REC semarang--komunitas
reptil-semarang--KSE-komunitas satwa eksotik—komunitas semarang—komunitas
reptil—komunitas reptil semarang—komunitas satwa—komunitas satwa
semarang—komunitas reptil semarang—komunitas semarang—T-REC semarang hari
ini—T-REC semarang terkini—T-REC semarang terbaru—berita T-REC semarang hari
ini—berita T-REC semarang terkini—berita T-REC semarang terbaru—berita
komunitas T-REC semarang hari ini—berita komunitas T-REC semarang
terbaru—berita komunitas T-REC semarang terkini—berita komunitas reptil T-REC
semarang hari ini—berita komunitas reptil T-REC terbaru—berita komunitas reptil
T-REC terkini--komunitas reptil T-REC semarang—komunitas T-REC semarang—berita
tentang flora fauna lingkungan hari ini—berita tentang flora fauna lingkungan
terbaru—berita tentang flora fauna lingkungan terkini—komunitas reptil dan
satwa semarang—komunitas reptil dan satwa T-REC semarang—berita komunitas
semarang hari ini—berita komunitas semarang terkini—berita komunitas semarang
terbaru—berita komunitas reptil semarang hari ini—berita komunitas reptil
semarang terbaru—berita komunitas semarang
terkini—beritamerdeka—beritaterkini—beritahariini—beritaterbaru—beritasatu—beritalingkungan—beritanews—newssatuberita—beritamerdekasemarang—beritasatusemarang—blogberitasemarang—beritablogsemarang—beritajawapossemarang—beritametrosemarang—metroberitasemarang—tvonesemarang---beritasatulingkungansemarang—possemarangberitasatuterkini—beritalingkungansatuterkinisemarang—beritametrosemaranghariini--beritamerdekasemarangterdepan—koransatusemarang—koranmerdekasemarang—koranmetrosemarang—koranjawasemarang--chloe
ardella raisya putri kamarsyah—prianka putri—aldhika budi pradana--berita
artikel terkait tentang genome,engineering,flowering
plant,plant,genom,rekayasa,tanaman,
genes,Arabidopsis thaliana,gen,
CRISPR/Cas9,mutation,mutasi,species,Sangat efisien
rekayasa genom pada tanaman berbunga yang sangat efisien
...........................
SILAHKAN MENGGUNAKAN " MESIN TRANSLATE
"..GOOGLE TRANSLATE
DISAMPING KANAN INI.............
PLEASE USE ........ "TRANSLATE
MACHINE" .. GOOGLE TRANSLATE BESIDE RIGHT THIS
........................................
........................................
........................................
........................................
T-REC -TUGUMUDA REPTILES COMMUNITY-INDONESIA
More info :
minat gabung : ( menerima keanggotaan seluruh
kota dan daerah di Indonesia )
08995557626 / 764047D2
MORE
MORE
FAST
RESPON :
08995557626/764047D2
FAST
RESPON :
08995557626/764047D2
..................................
..................................
..................................
KSE – KOMUNITAS SATWA EKSOTIK –
EXOTIC PETS COMMUNITY-- INDONESIA
Visit Our Community and Joint W/ Us....Welcome
All Over The World
KSE = KOMUNITAS SATWA EKSOTIK
MENGATASI KENDALA MINAT DAN JARAK
KAMI ADA DI TIAP KOTA DI INDONESIA
GABUNG......... ( menerima keanggotaan seluruh
kota dan daerah di Indonesia )
HUBUNGI : 08995557626
MORE
MORE
FAST
RESPON :
08995557626/764047D2
FAST
RESPON :
08995557626/764047D2
........Komunitas
T-REC
semarang,komunitas reptil tugumuda reptiles community semarang,komunitas
reptil
tugumuda semarang,komunitas semarang,komunitas reptil
semarang.............kenali
dan dalami satwa dan reptil dengan bergabung
bersama
kami,hubungi 08995557626 / 764047D2.....
........Komunitas
KSE
,komunitas satwa eksotik ,komunitas satwa.............kenali dan dalami
satwa dan
reptil dengan bergabung bersama kami,hubungi 08995557626 /
764047D2.....
.......................
......................
.......................
rekayasa genom pada tanaman berbunga
yang sangat efisien
Pengembangan metode cepat untuk
knockout gen pada Arabidopsis thaliana
Tanggal:
5 Desember 2016
Sumber:
Institut Transformatif Bio-Molekul
(WPI-ITbM), Nagoya University
Ringkasan:
ahli biologi tanaman telah mengembangkan
metode editing genom untuk target KO gen t dalam model tanaman dengan efisiensi tinggi. Tim melaporkan vektor baru
CRISPR / Cas9 untuk pabrik model yang dapat sangat menginduksi mutasi
yang diwariskan. Metode ini diharapkan menjadi alat molekul yang kuat untuk
rekayasa genom dalam berbagai spesies tanaman.
label
genome,engineering,flowering plant,plant,genom,rekayasa,tanaman,
genes,Arabidopsis thaliana,gen,
CRISPR/Cas9,mutation,mutasi,species,Sangat efisien
rekayasa genom pada tanaman berbunga yang sangat efisien
......................
ahli biologi tanaman di Institut
Transformatif Bio-Molekul (ITbM) dari Nagoya University, telah melaporkan dalam
jurnal Plant dan Cell Physiology, pada pengembangan vektor baru (carrier untuk
mentransfer informasi genetik) untuk sasaran
KO gen dalam model tanaman ,
Arabidopsis thaliana, dengan cara yang sangat efisien dan diwariskan.
genom terdiri dari himpunan organisme
lengkap DNA, termasuk gen, yang berisi semua informasi yang dibutuhkan untuk
mengembangkan dan memelihara organisme. rekayasa genom, yang melibatkan modifikasi
spesifik bagian dari genom dengan menghapus, menambah dan mengubah bagian dari
urutan DNA, adalah teknik yang
berkembang pesat. Sejauh ini, sistim CRISPR
(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)/Cas9
(CRISPR-associated protein 9) adalah salah satu metode yang paling populer
untuk manipulasi genetik yang timbul dari kesederhanaan, fleksibilitas dan
efisiensi.
Meskipun demikian, mutasi mendorong
efisiensi CRISPR / Cas9 terhadap tanaman model, Arabidopsis thaliana, tetap agak
rendah sejauh ini. Hal ini karena pemicu mutasi gen diaktifkan pada tahap
perkembangan selanjutnya dalam sel. Oleh karena itu, sejumlah besar waktu, tenaga dan species tanaman telah
diperlukan untuk mendapatkan spesies tanaman yang diinginkan dengan gen yang
ditargetkan tersingkir.
CRISPR / Cas9 terdiri dari 2 molekul
kunci, sepotong RNA disebut panduan RNA (gRNA) dan enzim yang disebut Cas9.
Cas9 bertindak sebagai gunting molekuler yang dapat memotong kedua untai DNA di
lokasi tertentu dalam genom, sehingga urutan DNA dapat ditambahkan atau dihapus
pada posisi itu. Di sisi lain, gRNA terdiri dari urutan RNA pra-desain (sekitar
20 basis panjangnya ) yang terletak di dalam perancah RNA lagi. RNA perancah
mengikat DNA dan urutan RNA pra-dirancang memandu protein Cas9 ke bagian
tertentu dari genom, sehingga Cas9 dapat dipotong pada posisi yang ditargetkan.
"Dengan menggunakan promotor untuk
ribosomal PROTEIN S5A (RPS5A) gen, yang dinyatakan
dari tahap embrionik awal sel tumbuhan, kami mampu menginduksi protein Cas9
untuk KO gen dalam sel telur dengan efisiensi tinggi," kata Hiroki
Tsutsui, penulis pertama studi ini. "Promotor RPS5A ini aktif dalam sel
telur dan kami memutuskan untuk memanggil alat molekuler ini, pKAMA-ITACHI Red
(pKIR) vektor, yang dapat mengedit genom tanaman dalam efisiensi relatif
tinggi terhadap promotor 35S umum
digunakan pada tanaman," ia melanjutkan .
'Kama-itachi' memiliki makna Jepang
adalah tiga makhluk seperti-musang. Hal ini mirip dengan proses sistem
CRISPR / Cas9 terhadap DNA, di mana
target CRISPR, pemotongan Cas9, dan menginduksi perbaikan urutan DNA tertentu
yang menarik.
"Dengan kemampuan untuk efisien KO
gen yang ditargetkan di Arabidopsis thaliana, kami menganggap ini menjadi
metode yang menjanjikan untuk menjelaskan fungsi genetik tanaman," kata
Tetsuya Higashiyama, seorang Profesor dan pemimpin penelitian ini. "Kami
berharap bahwa kita dapat menerapkan metodologi ini untuk mengedit genom
tanaman, seperti Brassica napus, untuk mempercepat pertumbuhan mereka dan
menghasilkan berbagai varitas jalur
tanaman."
sistem CRISPR / Cas9 bekerja dengan
merobohkan sebuah gen tertentu dalam rangka untuk menyelidiki fungsi mereka.
Dalam model tanaman, Arabidopsis thaliana, sebagai protein Cas9 dinyatakan pada
tahap perkembangan selanjutnya dari sel, tingkat knockout gen bervariasi sesuai
dengan jaringan. Oleh karena itu efisiensi genom mutasi relatif rendah.
Misalnya, ketika seorang yang biasa
menggunakan promotor 35S untuk tanaman untuk digunakan mengekspresikan protein Cas9 di Arabidopsis
thaliana, meskipun KO gen sering diamati pada daun, hanya beberapa yang
terdeteksi di bunga. Hal ini menunjukkan bahwa efisiensi mutasi sistem
gugur/KO gen target
relatif rendah pada sel-sel reproduksi bunga. Selanjutnya, mutasi sistem
gugur itu sulit untuk diteruskan ke sel
anak pada generasi berikutnya.
Untuk mengatasi masalah ini, kelompok
Higashiyama memutuskan untuk mengekspresikan protein Cas9 dalam sel telur dan
di dalam sel selama tahap perkembangan awal, dalam rangka meningkatkan
efisiensi sistem gugur dari gen.
"Karena sel telur dan sel telur
dibuahi (zigot) adalah asal bagi sel-sel tanaman untuk tumbuh dan berkembang,
kita tahu bahwa jika editing genom dilakukan pada tahap awal, mutasi gen dapat
terjadi dengan efisiensi tinggi dan dapat diwariskan oleh generasi sel
berikutnya , "jelas Tsutsui. " pKIR vektor adalah ideal karena terus
menerus dapat mengekspresikan protein Cas9 selama tahap sel telur dan tahap
perkembangan."
Tim pertama berusaha dengan sistem
gugur/KO PDS3 (phytoene desaturase 3)
gen, yang diketahui bertanggung jawab untuk sintesis klorofil pada tanaman.
Tanpa klorofil, tanaman akan menjadi spesies albino dengan penampilan putih.
Dengan mengungkapkan Cas9 dengan pKIR, Tsutsui berhasil mengamati knockout gen
PDS3, ditunjukkan oleh generasi tanaman albino.
Tsutsui juga meneliti efek pada jumlah
klorofil disintesis di batang bunga, ketika gen PDS3 tersingkir. Setelah
penggunaan promotor 35S untuk mengekspresikan Cas9, jumlah klorofil hanya
sedikit berbeda dengan jumlah yang diamati dalam jenis liar. Di sisi lain,
ketika Cas9 diinduksi oleh pKIR, jumlah klorofil menurun drastis, menunjukkan
bahwa sistem gugur/KO gen telah terjadi
secara efisien.
Tim juga menemukan bahwa vektor pKIR
berhasil mengetuk keluar gen lain dalam Arabidopsis thaliana, seperti AGAMOUS
(AG), DUO1 (DUO POLLEN 1), dan ADH1 (ALKOHOL dehidrogenase 1), yang terlibat
dalam pengembangan bunga, sperma sel, dan enzim yang mengubah alkohol menjadi
aldehid, masing-masingnya .
AGAMOUS merupakan faktor transkripsi
yang terlibat dalam pengembangan bunga (bunga meristem). Setelah knockout gen
AGAMOUS yang disebabkan oleh pKIR, bunga dalam bunga, yang dikenal sebagai
bunga ganda diamati pada frekuensi tinggi. Selain itu, dalam percobaan knockout
gen DUO1, yang mengkode garis male germ , yang disebabkan oleh pKIR, pembelahan
sel dari sel generatif telah rusak dan sel non-subur sperma seperti diamati.
Gen ADH1, yang mengkode enzim yang
mengubah alil alkohol menjadi akrolein (aldehida), juga tersingkir oleh induksi
dengan pKIR dalam frekuensi tinggi. frekuensi tinggi ini menunjukkan bahwa gen
ADH1 tersingkir di semua sel reproduksi (sel telur dan sperma) di generasi
pertama. Mutan dengan KO gen ADH1 mampu bertahan, sedangkan tipe dan
heterozigot tanaman liar tewas karena generasi akrolein, yang merupakan racun
bagi tanaman.
"Karena semua spesies di generasi
kedua menunjukkan pola mutasi yang sama, ini menunjukkan bahwa editing genom
telah terjadi di awal tahap perkembangan (dalam sel telur dari generasi
pertama)," deskripsi Tsutsui.
Untuk dengan mudah mengidentifikasi
spesies diinstal dengan gen untuk CRISPR / Cas9, benih yang mengandung Cas9
ditandai dengan fluoresensi merah.
Tsutsui dan Higashiyama telah menemukan
metode yang efisien untuk mengedit genom Arabidopsis thaliana, yang terdiri
dari mengekspresikan Cas9 dengan promotor RPS5A (pKIR vektor) yang dapat KO gen
dalam sel selama tahap perkembangan awal dan menginduksi mutasi yang dapat
diteruskan ke sel anak pada generasi berikutnya.
"Metode pKIR ini memungkinkan kita
untuk menyelidiki kelompok gen, yang mungkin memiliki fungsi yang tumpang
tindih," kata Tsutsui. "Sebelumnya, kami harus membuat beberapa
tanaman knockout dengan menyeberangi mutan yang ada untuk memeriksa tumpang
tindih fungsi gen, yang mengambil waktu. Kami harus mampu mengeksplorasi fungsi
kelompok gen tak dikenal dengan mampu dengan cepat mengakses mutan dengan
metode biaya yang relatif rendah kami. "
"Kami berharap kami dapat terus
meningkatkan metode ini untuk meningkatkan efisiensi mutasi, sehingga menjadi
alat rekayasa genom berguna untuk memodifikasi urutan DNA target dalam berbagai
organisme," kata Higashiyama.
SUMBER :
https://www.sciencedaily.com/releases/2016/12/161205085925.htm
Story
Source:
Journal
Reference:
- Hiroki Tsutsui, Tetsuya
Higashiyama. pKAMA-ITACHI vectors for highly efficient
CRISPR/Cas9-mediated gene knockout in Arabidopsis thaliana. Plant
and Cell Physiology, 2016; pcw191 DOI: 10.1093/pcp/pcw191
Highly efficient genome engineering in flowering plants
Development of a rapid method to knockout genes in Arabidopsis thaliana
Date:
December 5, 2016
Source:
Institute of Transformative Bio-Molecules (WPI-ITbM), Nagoya University
Summary:
Plant biologists have developed a genome editing method to knockout target genes in a model plant with high efficiency. The team reports a new CRISPR/Cas9 vector for the model plant that can strongly induce inheritable mutations. This method is expected to become a powerful molecular tool for genome engineering in various plant species.
A pair of plant biologists at the Institute of Transformative Bio-Molecules (ITbM) of Nagoya University, has reported in the journal Plant and Cell Physiology, on the development of a new vector (a carrier to transfer genetic information) to knockout the target genes in the model plant, Arabidopsis thaliana, in a highly efficient and inheritable manner.
The genome consists of the organism's complete set of DNA, including its genes, which contains all the information needed to develop and maintain the organism. Genome engineering, which involves specific modification of parts of the genome by removing, adding and altering sections of the DNA sequence, is a rapidly developing technique. So far, the CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)/Cas9 (CRISPR-associated protein 9) system is one of the most popular methods for genetic manipulation arising from its simplicity, versatility and efficiency.
Nonetheless, the mutation inducing efficiency of CRISPR/Cas9 towards the model plant, Arabidopsis thaliana, has remained somewhat low so far. This is because the trigger for gene mutation is activated at later developmental stages in cells. Therefore, a significant amount of time, effort and plant species has been required to obtain the desired plant species with the targeted gene knocked out.
CRISPR/Cas9 consists of 2 key molecules, a piece of RNA called guide RNA (gRNA) and an enzyme called Cas9. Cas9 acts as a molecular scissor that can cut both strands on DNA at a specific location in the genome, so that DNA sequences can be added or removed at that position. On the other hand, the gRNA consists of a pre-designed RNA sequence (about 20 bases long) that is located within a longer RNA scaffold. The RNA scaffold binds to DNA and the pre-designed RNA sequence guides the Cas9 protein to the specific part of the genome, so that Cas9 can cut at the targeted position.
"By using a promoter for a RIBOSOMAL PROTEIN S5A (RPS5A) gene, which is expressed from an early embryonic stage in plant cells, we were able to induce the Cas9 protein to knockout genes in egg cells with high efficiency," says Hiroki Tsutsui, the first author of this study. "This RPS5A promoter is active in egg cells and we decided to call this molecular tool, a pKAMA-ITACHI Red (pKIR) vector, which can edit the plant's genome in high efficiency relative to the 35S promoter commonly used in plants," he continues.
'Kama-itachi' has the Japanese meaning of three weasel-like creatures, where the first weasel targets and trips a person, followed by the second one injuring the person by cutting them, and the third one healing the person. This is similar to the process of the CRISPR/Cas9 system towards DNA, where CRISPR targets, Cas9 cuts, and induces repair of the specific DNA sequence of interest.
"By being able to efficiently knockout the targeted gene in Arabidopsis thaliana, we consider this to be a promising method to elucidate the genetic functions of plants," says Tetsuya Higashiyama, a Professor and leader of this research. "We hope that we can apply this methodology for genome editing of crops, such as Brassica napus, to accelerate their growth and generate a variety of plant lines."
The CRISPR/Cas9 system works by knocking out a specific gene in order to investigate their function. In the model plant, Arabidopsis thaliana, as the Cas9 protein is expressed at a later developmental stage of the cell, the degree of gene knockout varies according to the tissue. The genome mutation efficiency has therefore been relatively low.
For instance, when a
commonly used 35S promoter for plants was used to express the Cas9 protein in
Arabidopsis thaliana, although frequent knockouts of the genes were observed in
the leaves, only a few were detected in flowers. This suggests that the
knockout mutation efficiency of the target gene was relatively low in the
reproductive cells of flowers. Subsequently, the knockout mutation was
difficult to be passed on to the daughter cells in the next generation.
In order to solve this issue, Higashiyama's group decided to express the
Cas9 protein in the egg cell and in the cell during the early developmental
stage, in order to improve the knockout efficiency of the genes.
"Since egg cells and fertilized egg cells (zygotes) are the origin for
plant cells to develop and grow, we figured that if genome editing is carried
out at an early stage, gene mutation may occur with high efficiency and can be
inherited by the next generation of cells," explains Tsutsui. "The
pKIR vector was ideal as it can continuously express the Cas9 protein during
the egg cell stage and the developmental stage."
The team first
attempted the knockout of the PDS3 (Phytoene DeSaturase 3) gene, which is known
to be responsible for the synthesis of chlorophyll in plants. Without
chlorophyll, the plant will become an albino species with a white appearance.
By expressing Cas9 with pKIR, Tsutsui succeeded in observing the knockout of
the PDS3 gene, indicated by the generation of an albino plant.
Tsutsui also
investigated the effect on the amount of chlorophyll synthesized in the flower
stem, when the PDS3 gene was knocked out. Upon use of the 35S promoter to
express Cas9, the amount of chlorophyll was only slightly different to the
amount observed in the wild type. On the other hand, when Cas9 was induced by
pKIR, the amount of chlorophyll decreased drastically, suggesting that knockout
of the gene had occurred efficiently.
The team also found that the pKIR vector successfully knocks out other
genes in Arabidopsis thaliana, such as AGAMOUS (AG), DUO1 (DUO POLLEN 1), and
ADH1 (ALCOHOL DEHYDROGENASE 1), which are involved in the development of the
flower, sperm cell, and an enzyme that converts alcohol to aldehydes,
respectively.
AGAMOUS is a transcription factor involved in flower development (floral
meristem). Upon knockout of the AGAMOUS gene induced by pKIR, a flower within a
flower, known as a double flower was observed in high frequency. In addition,
in the knockout experiment of DUO1 gene, which encodes a male germ line, induced
by pKIR, cell division of the generative cell was impaired and a non-fertile
sperm-like cell was observed.
The ADH1 gene, which
encodes an enzyme that converts allyl alcohol into acrolein (an aldehyde), was
also knocked out by induction with pKIR in high frequency. This high frequency
suggests that the ADH1 gene was knocked out in all of the reproductive cells
(egg and sperm cells) in the first generation. Mutants with the ADH1 gene
knockout were able to survive, while the wild type and heterozygous plants were
killed due to the generation of acrolein, which is toxic for plants.
"Since all of the
species in the second generation showed the same mutation pattern, this
indicates that genome editing had occurred early in the developmental stage (in
the egg cells of the first generation)," describes Tsutsui.
In order to easily
identify the species installed with genes for CRISPR/Cas9, the seeds that
contain Cas9 are marked by red fluorescence.
Tsutsui and
Higashiyama have found an efficient method for genome editing of Arabidopsis
thaliana, which consists of expressing Cas9 with a RPS5A promoter (pKIR vector)
that can knockout the genes in cells during an early developmental stage and
induce mutations that can be passed on to the daughter cells in the next generation.
"This pKIR method
allows us to investigate gene clusters, which may have overlapping
functions," says Tsutsui. "Previously, we had to make multiple
knockout plants by crossing existing mutants to examine overlapping gene
functions, which took time. We should be able to explore the functions of
unidentified gene clusters by being able to rapidly access mutants by our
relatively low cost method."
"We hope we can
continue to improve this method to increase the mutation efficiency, so that it
becomes a useful genome engineering tool for modifying the target DNA sequences
in various organisms," says Higashiyama.
https://www.sciencedaily.com/releases/2016/12/161205085925.htm
Story Source:
Journal Reference:
- Hiroki Tsutsui, Tetsuya Higashiyama. pKAMA-ITACHI vectors for highly efficient CRISPR/Cas9-mediated gene knockout in Arabidopsis thaliana. Plant and Cell Physiology, 2016; pcw191 DOI: 10.1093/pcp/pcw191
toko reptil murah.......toko reptil untuk pemula...........toko reptil untuk newbie......toko reptil dan satwa murah........toko reptil dan satwa untuk pemula.......toko reptil dan satwa untuk newbie...........cara merawat reptil untuk pemula..........cara merawat reptil untuk newbie.........cara merawat reptil untuk pemula konsultasi gratis sampai bisa..........cara merawat reptil untuk newbie konsultasi gratis sampai bisa........toko reptil murah semarang..........toko reptil untuk pemula semarang........toko reptil untuk newbie semarang...........toko reptil dan satwa murah semarang............toko reptil dan satwa untuk pemula semarang..........toko reptil dan satwa untuk newbie semarang...........cara merawat reptil untuk pemula semarang.........cara merawat reptil untuk newbie semarang.........cara merawat reptil untuk pemula konsultasi gratis sampai bisa semarang.........cara merawat reptil untuk newbie konsultasi gratis sampai bisa semarang.......08995557626/764047D2
toko online reptil.......toko online satwa.........toko online reptil untuk pemula.........toko online satwa untuk pemula..........toko online reptil untuk newbie...........toko online satwa untuk newbie............mengenal dan memilih reptil,ular,iguana yang tepat untuk pemula............mengenal dan memilih reptil,ular,iguana yang tepat untuk newbie.............mengenal dan memilih reptil,ular,iguana yang tepat untuk pemula, konsultasi gratis sampai jelas dan bisa............mengenal dan memilih reptil,ular,iguana yang tepat untuk newbie, konsultasi gratis sampai jelas dan bisa...........jenis jenis iguana yang biasa dipelihara dan cocok untuk pemula..........jenis jenis iguana yang biasa dipelihara dan cocok untuk newbie.........jenis jenis iguana yang biasa dipelihara dan cocok untuk pemula, konsultasi gratis dan sampai jelas dan mengerti...........jenis jenis iguana yang biasa dipelihara dan cocok untuk newbie, konsultasi gratis dan sampai jelas dan mengerti...........toko online reptil semarang..........toko online satwa semarang..........toko online reptil untuk pemula semarang............toko online satwa untuk pemula semarang............toko online reptil untuk newbie semarang..........toko online satwa untuk newbie semarang..........mengenal dan memilih reptil,ular,iguana yang tepat untuk pemula semarang..........mengenal dan memilih reptil,ular,iguana yang tepat untuk newbie semarang.........mengenal dan memilih reptil,ular,iguana yang tepat untuk pemula, konsultasi gratis sampai jelas dan bisa semarang..........mengenal dan memilih reptil,ular,iguana yang tepat untuk newbie, konsultasi gratis sampai jelas dan bisa semarang........jenis jenis iguana yang biasa dipelihara dan cocok untuk pemula semarang..........jenis jenis iguana yang biasa dipelihara dan cocok untuk newbie semarang..........jenis jenis iguana yang biasa dipelihara dan cocok untuk pemula, konsultasi gratis dan sampai jelas dan mengerti semarang...........jenis jenis iguana yang biasa dipelihara dan cocok untuk newbie, konsultasi gratis dan sampai jelas dan mengerti semarang.........08995557626/764047D2
komunitas untuk pemula.......komunitas untuk newbie........komunitas reptil untuk pemula.........komunitas reptil untuk newbie.........komunitas satwa untuk pemula.........komunitas satwa untuk newbie..........komunitas ular untuk pemula.........komunitas ular untuk newbie...........komunitas iguana untuk pemula.........komunitas iguana untuk newbie...........komunitas biawak untuk pemula...........komunitas biawak untuk newbie..........komunitas kadal untuk pemula..........komunitas kadal untuk newbie
..........komunitas musang untuk pemula...........komunitas musang untuk newbie.........08995557626/764047D2
komunitas untuk pemula semarang.....komunitas untuk newbie semarang.........komunitas reptil untuk pemula semarang........komunitas reptil untuk newbie semarang........komunitas satwa untuk pemula semarang.......komunitas satwa untuk newbie semarang........komunitas ular untuk pemula semarang........komunitas ular untuk newbie semarang.........komunitas iguana untuk pemula semarang.......komunitas iguana untuk newbie semarang.........komunitas biawak untuk pemula semarang........komunitas biawak untuk newbie semarang........komunitas kadal untuk pemula semarang......komunitas kadal untuk newbie semarang.......komunitas musang untuk pemula semarang...........komunitas musang untuk newbie semarang.......08995557626/764047D2
hal hal yang perlu dipersiapkan untuk memelihara reptil bagi pemula,konsultasi gratis sampai bisa...hal hal yang perlu dipersiapkan untuk memelihara reptil bagi newbie,konsultasi gratis sampai bisa...hal hal yang perlu dipersiapkan untuk memelihara satwa bagi pemula,konsultasi gratis sampai bisa...hal hal yang perlu dipersiapkan untuk memelihara satwa bagi newbie,konsultasi gratis sampai bisa...hal hal yang perlu dipersiapkan untuk memelihara ular bagi pemula,konsultasi gratis sampai bisa....hal hal yang perlu dipersiapkan untuk memelihara ular bagi newbie,konsultasi gratis sampai bisa....hal hal yang perlu dipersiapkan untuk memelihara iguana bagi pemula,konsultasi gratis sampai bisa...hal hal yang perlu dipersiapkan untuk memelihara iguana bagi newbie,konsultasi gratis sampai bisa....hal hal yang perlu dipersiapkan untuk memelihara kadal bagi pemula,konsultasi gratis sampai bisa....hal hal yang perlu dipersiapkan untuk memelihara kadal bagi newbie,konsultasi gratis sampai bisa.....hal hal yang perlu dipersiapkan untuk memelihara biawak bagi pemula,konsultasi gratis sampai bisa....hal hal yang perlu dipersiapkan untuk memelihara biawak bagi newbie,konsultasi gratis sampai bisa....hal hal yang perlu dipersiapkan untuk memelihara musang bagi pemula,konsultasi gratis sampai bisa....hal hal yang perlu dipersiapkan untuk memelihara musang bagi newbie,konsultasi gratis sampai bisa....hal hal yang perlu dipersiapkan untuk memelihara kura kura bagi pemula,konsultasi gratis sampai bisa....hal hal yang perlu dipersiapkan untuk memelihara kura kura bagi newbie,konsultasi gratis sampai bisa....08995557626/764047D2
...............
tips tepat mencari dan memilih hewan peliharaan bagi pemula......cara memilih hewan peliharaan yang tepat bagi pemula........mengenal jenis jenis hewan peliharaan yang tepat dan aman bagi pemula.......cara membuat kandang untuk hewan peliharaan bagi pemula........toko online hewan peliharaan bagi pemula...........toko online hewan peliharaan ..........syarat bergabung dengan komunitas hewan peliharaan bagi pemula........cara mengobati hewan peliharaan yang sakit bagi pemula.........cara mencegah hewan peliharaan tidak tertular penyakit bagi pemula...........obat obatan untuk hewan peliharaan yang sakit bagi pemula..................tips tepat mencari dan memilih hewan peliharaan bagi newbie...........cara memilih hewan peliharaan yang tepat bagi newbie........mengenal jenis jenis hewan peliharaan yang tepat dan aman bagi newbie........cara membuat kandang untuk hewan peliharaan bagi newbie.........toko online hewan peliharaan bagi newbie.......toko online hewan peliharaan .........toko online hewan peliharaan bagi pemula...........toko online hewan peliharaan bagi newbie.............syarat bergabung dengan komunitas hewan peliharaan bagi newbie.........cara mengobati hewan peliharaan yang sakit bagi newbie.........cara mencegah hewan peliharaan tidak tertular penyakit bagi newbie..........obat obatan untuk hewan peliharaan yang sakit bagi newbie........tips tepat mencari dan memilih reptil bagi pemula........cara memilih reptil yang tepat bagi pemula..........mengenal jenis jenis reptil yang tepat dan aman bagi pemula.........cara membuat kandang untuk reptil bagi pemula.........toko online reptil bagi pemula.......toko online reptil.........syarat bergabung dengan komunitas reptil bagi pemula........cara mengobati reptil yang sakit bagi pemula...........cara mencegah reptil tidak tertular penyakit bagi pemula.........obat obatan untuk reptil yang sakit bagi pemula..........tips tepat mencari dan memilih reptil bagi newbie........cara memilih reptil yang tepat bagi newbie..............mengenal jenis jenis reptil yang tepat dan aman bagi newbie........cara membuat kandang untuk reptil bagi newbie........toko online reptil bagi newbie...........toko online reptil.........toko online reptil bagi pemula.......toko online hewan peliharaan bagi newbie........syarat bergabung dengan komunitas reptil bagi newbie.........cara mengobati reptil yang sakit bagi newbie.........cara mencegah reptil tidak tertular penyakit bagi newbie..........obat obatan untuk reptil yang sakit bagi newbie.........tips tepat mencari dan memilih ular dan iguana bagi pemula..........cara memilih ular dan iguana yang tepat bagi pemula..............mengenal jenis jenis ular dan iguana yang tepat dan aman bagi pemula.........cara membuat kandang untuk ular dan iguana bagi pemula..........toko online ular dan iguana bagi pemula........toko online ular dan iguana ........syarat bergabung dengan komunitas ular dan iguana bagi pemula..........cara mengobati ular dan iguana yang sakit bagi pemula...........cara mencegah ular dan iguana tidak tertular penyakit bagi pemula...........obat obatan untuk ular dan iguana yang sakit bagi pemula........tips tepat mencari dan memilih ular dan iguana bagi newbie.........cara memilih ular dan iguana yang tepat bagi newbie...............mengenal jenis jenis ular dan iguana yang tepat dan aman bagi newbie............cara membuat kandang untuk ular dan iguana bagi newbie..........toko online ular dan iguana bagi newbie.................toko online ular dan iguana ...........toko online ular dan iguana bagi pemula...........toko online ular dan iguana bagi newbie..........syarat bergabung dengan komunitas ular dan iguana bagi newbie.............cara mengobati ular dan iguana yang sakit bagi newbie.............cara mencegah ular dan iguana tidak tertular penyakit bagi newbie............obat obatan untuk ular dan iguana yang sakit bagi newbie.............konsultasi gratis bagi pemula dan newbie sampai jelas dan bisa........... 08995557626/764047D2
.....................................
cara membuat kandang hewan peliharaan yang benar untuk pemula....ukuran panjang lebar tinggi yang tepat untuk kandang hewan peliharaan bagi pemula....memilih jenis material yang tepat untuk membuat kandang hewan peliharaan bagi pemula.....perbandingan panjang lebar tinggi yang ideal dan tepat bagi kandang hewan peliharaan bagi pemula.......cara membuat kandang hewan peliharaan yang benar untuk newbie......ukuran panjang lebar tinggi yang tepat untuk kandang hewan peliharaan bagi newbie.......memilih jenis material yang tepat untuk membuat kandang hewan peliharaan bagi newbie.......perbandingan panjang lebar tinggi yang ideal dan tepat bagi kandang hewan peliharaan bagi newbie......toko hewan peliharaan......toko online hewan peliharaan......toko hewan peliharaan murah......toko on line hewan peliharaan murah......toko hewan peliharaan untuk pemula.....toko online hewan peliharaan untuk pemula......toko hewan peliharaan murah untuk pemula.....toko on line hewan peliharaan murah pemula......toko hewan peliharaan untuk newbie.....toko online hewan peliharaan untuk newbie.....toko hewan peliharaan murah untuk newbie.....toko on line hewan peliharaan murah untuk newbie....toko hewan peliharaan semarang.....toko online hewan peliharaan semarang.....toko hewan peliharaan murah semarang....toko on line hewan peliharaan murah semarang....toko hewan peliharaan untuk pemula semarang....toko online hewan peliharaan untuk pemula semarang....toko hewan peliharaan murah untuk pemula semarang....toko on line hewan peliharaan murah pemula semarang....toko hewan peliharaan untuk newbie semarang....toko online hewan peliharaan untuk newbie semarang.....toko hewan peliharaan murah untuk newbie semarang.....toko on line hewan peliharaan murah untuk newbie semarang.....cara membuat kandang hewan peliharaan yang benar untuk pemula semarang.....ukuran panjang lebar tinggi yang tepat untuk kandang hewan peliharaan bagi pemula semarang.....memilih jenis material yang tepat untuk membuat kandang hewan peliharaan bagi pemula semarang.....perbandingan panjang lebar tinggi yang ideal dan tepat bagi kandang hewan peliharaan bagi pemula semarang.....cara membuat kandang hewan peliharaan yang benar untuk newbie semarang.....ukuran panjang lebar tinggi yang tepat untuk kandang hewan peliharaan bagi newbie semarang .....memilih jenis material yang tepat untuk membuat kandang hewan peliharaan bagi newbie semarang.....perbandingan panjang lebar tinggi yang ideal dan tepat bagi kandang hewan peliharaan bagi newbie semarang....komunitas hewan peliharaan.....komunitas hewan peliharaan semarang.....konsultasi gratis 08995557626/764047D2.....cara membuat kandang ular iguana musang kadal biawak gecko yang benar untuk pemula.....ukuran panjang lebar tinggi yang tepat untuk ular iguana musang kadal biawak gecko peliharaan bagi pemula.....memilih jenis material yang tepat untuk membuat kandang ular iguana musang kadal biawak gecko bagi pemula.....perbandingan panjang lebar tinggi yang ideal dan tepat bagi kandang ular iguana musang kadal biawak gecko bagi pemula.....cara membuat kandang ular iguana musang kadal biawak gecko yang benar untuk newbie.....ukuran panjang lebar tinggi yang tepat untuk kandang ular iguana musang kadal biawak gecko bagi newbie.....memilih jenis material yang tepat untuk membuat kandang ular iguana musang kadal biawak gecko bagi newbie.....perbandingan panjang lebar tinggi yang ideal dan tepat bagi kandang ular iguana musang kadal biawak gecko bagi newbie....toko ular iguana musang kadal biawak gecko ....toko online ular iguana musang kadal biawak gecko .....toko ular iguana musang kadal biawak gecko murah.....toko on line ular iguana musang kadal biawak gecko murah.....toko ular iguana musang kadal biawak gecko untuk pemula.....toko online ular iguana musang kadal biawak gecko untuk pemula.....toko ular iguana musang kadal biawak gecko murah untuk pemula.....toko on line ular iguana musang kadal biawak gecko murah pemula....toko ular iguana musang kadal biawak gecko untuk newbie.....toko online ular iguana musang kadal biawak gecko untuk newbie.....toko hewan ular iguana musang kadal biawak gecko untuk newbie....toko on line ular iguana musang kadal biawak gecko murah untuk newbie....toko ular iguana musang kadal biawak gecko semarang.....toko online ular iguana musang kadal biawak gecko semarang....toko ular iguana musang kadal biawak gecko murah semarang.....toko on line ular iguana musang kadal biawak gecko murah semarang.....toko ular iguana musang kadal biawak gecko untuk pemula semarang.....toko online ular iguana musang kadal biawak gecko untuk pemula semarang.....toko ular iguana musang kadal biawak gecko murah untuk pemula semarang.....toko on line ular iguana musang kadal biawak gecko murah pemula semarang.....toko ular iguana musang kadal biawak gecko untuk newbie semarang....toko online ular iguana musang kadal biawak gecko untuk newbie semarang....toko ular iguana musang kadal biawak gecko murah untuk newbie semarang......toko on line ular iguana musang kadal biawak gecko murah untuk newbie semarang.....cara membuat kandang ular iguana musang kadal biawak gecko yang benar untuk pemula semarang.....ukuran panjang lebar tinggi yang tepat untuk kandang ular iguana musang kadal biawak gecko bagi pemula semarang.....memilih jenis material yang tepat untuk membuat kandang ular iguana musang kadal biawak gecko bagi pemula semarang.....perbandingan panjang lebar tinggi yang ideal dan tepat bagi kandang ular iguana musang kadal biawak gecko bagi pemula semarang.....cara membuat kandang ular iguana musang kadal biawak gecko yang benar untuk newbie semarang....ukuran panjang lebar tinggi yang tepat untuk kandang ular iguana musang kadal biawak gecko bagi newbie semarang ....memilih jenis material yang tepat untuk membuat kandang ular iguana musang kadal biawak gecko bagi newbie semarang.....perbandingan panjang lebar tinggi yang ideal dan tepat bagi kandang ular iguana musang kadal biawak gecko bagi newbie semarang.....komunitas ular iguana musang kadal biawak gecko .....komunitas ular iguana musang kadal biawak gecko semarang.....konsultasi gratis 08995557626/764047D2
..................................
komunitas......komunitas satwa.........komunitas hewan peliharaan........komunitas binatang peliharaan......komunitas reptil........komunitas ular..........komunitas ular peliharaan.........komunitas iguana.........komunitas biawak..........komunitas kadal........komunitas bearded dragon.........komunitas panana.............komunitas blue tongue skink........komunitas skink.......komunitas tarantula........komunitas musang.......komunitas alam........komunitas lingkungan.........komunitas pecinta alam.......komunitas pemerhati alam.........komunitas penggiat alam........komunitas flora........komunitas pecinta flora.........komunitas fauna.........komunitas pecinta fauna...........berita komunitas........berita komunitas hari ini..........berita komunitas sekarang..........berita komunitas terkini...........berita komunitas ter up date.............berita komunitas terbaru..........berita komunitas satwa hewan peliharaan binatang peliharaan...........berita komunitas satwa hewan peliharaan binatang peliharaan hari ini..............berita komunitas satwa hewan peliharaan binatang peliharaan sekarang..........berita komunitas satwa hewan peliharaan binatang peliharaan terkini............berita komunitas satwa hewan peliharaan binatang peliharaan ter up date..........berita komunitas satwa hewan peliharaan binatang peliharaan terbaru.......berita komunitas reptil..........berita komunitas reptil hari ini..........berita komunitas reptil sekarang..........berita komunitas reptil terkini............berita komunitas reptil ter up date...........berita komunitas reptil terbaru..........berita komunitas ular iguana biawak kadal bearded dragon gecko panana musang owl BOP ..........berita komunitas ular iguana biawak kadal bearded dragon gecko panana musang owl BOP hari ini...............berita komunitas ular iguana biawak kadal bearded dragon gecko panana musang owl BOP sekarang...........berita komunitas ular iguana biawak kadal bearded dragon gecko panana musang owl BOP terkini...........berita komunitas ular iguana biawak kadal bearded dragon gecko panana musang owl BOP ter up date..........berita komunitas ular iguana biawak kadal bearded dragon gecko panana musang owl BOP terbaru.........berita komunitas pecinta reptil..........berita komunitas pecinta reptil hari ini..........berita komunitas pecinta reptil sekarang...........berita komunitas pecinta reptil terkini.............berita komunitas pecinta reptil ter up date..........berita komunitas pecinta reptil terbaru.........berita komunitas t-rec semarang..........berita komunitas t-rec semarang hari ini..........berita komunitas t-rec semarang sekarang.............berita komunitas t-rec semarang terkini..............berita komunitas t-rec semarang ter up date..........berita komunitas t-rec semarang terbaru...........berita komunitas reptil t-rec semarang.........berita komunitas reptil t-rec semarang hari ini..........berita komunitas reptil t-rec semarang sekarang..........berita komunitas reptil t-rec semarang terkini.........berita komunitas reptil t-rec semarang ter up date.........berita komunitas reptil t-rec semarang terbaru ...............komunitas semarang.........komunitas satwa semarang .........komunitas hewan peliharaan semarang ......komunitas binatang peliharaan semarang .......komunitas reptil semarang ..........komunitas ular semarang ..........komunitas ular peliharaan semarang .........komunitas iguana semarang ..........komunitas biawak semarang .........komunitas kadal semarang ...........komunitas bearded dragon semarang ............komunitas panana semarang ...........komunitas blue tongue skink semarang ...........komunitas skink semarang..............komunitas tarantula semarang .......komunitas musang semarang ...........komunitas alam semarang ...........komunitas lingkungan semarang .........komunitas pecinta alam semarang ..........komunitas pemerhati alam semarang ..........komunitas penggiat alam semarang .........komunitas flora semarang ..........komunitas pecinta flora semarang ..............komunitas fauna semarang ...........komunitas pecinta fauna semarang ........berita komunitas semarang ..........berita komunitas hari ini semarang ..........berita komunitas sekarang semarang ..........berita komunitas terkini semarang ...........berita komunitas ter up date semarang ......berita komunitas terbaru semarang .............berita komunitas satwa hewan peliharaan binatang peliharaan semarang ............berita komunitas satwa hewan peliharaan binatang peliharaan hari ini semarang .........berita komunitas satwa hewan peliharaan binatang peliharaan sekarang semarang ............berita komunitas satwa hewan peliharaan binatang peliharaan terkini semarang ..........berita komunitas satwa hewan peliharaan binatang peliharaan ter up date semarang ...........berita komunitas satwa hewan peliharaan binatang peliharaan terbaru semarang ............berita komunitas reptil semarang .........berita komunitas reptil hari ini semarang ...........berita komunitas reptil sekarang semarang .........berita komunitas reptil terkini semarang ............berita komunitas reptil ter up date semarang ........berita komunitas reptil terbaru semarang ...........berita komunitas ular iguana biawak kadal bearded dragon gecko panana musang owl BOP semarang .........berita komunitas ular iguana biawak kadal bearded dragon gecko panana musang owl BOP hari ini semarang .......berita komunitas ular iguana biawak kadal bearded dragon gecko panana musang owl BOP sekarang semarang ......berita komunitas ular iguana biawak kadal bearded dragon gecko panana musang owl BOP terkini semarang ......berita komunitas ular iguana biawak kadal bearded dragon gecko panana musang owl BOP ter up date semarang ........berita komunitas ular iguana biawak kadal bearded dragon gecko panana musang owl BOP terbaru semarang ........berita komunitas pecinta reptil semarang ........berita komunitas pecinta reptil hari ini semarang ........berita komunitas pecinta reptil sekarang semarang .......berita komunitas pecinta reptil terkini semarang........berita komunitas pecinta reptil ter up date semarang .........berita komunitas pecinta reptil terbaru semarang ............... more info : 08995557626/764047D2